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液相色譜法測定生物發(fā)酵產(chǎn)品中腺苷的含量

更新時(shí)間:2016-10-21      點(diǎn)擊次數(shù):3131

液相色譜法測定生物發(fā)酵產(chǎn)品中腺苷的含量

本方法適用于蟲草、菌粉、靈芝等產(chǎn)品系列發(fā)酵產(chǎn)品

1 儀器與試劑

1.1儀器配置

等度系統(tǒng)

具體配置

數(shù)量

備注

LC-500高壓輸液泵

1

 

SPD-500紫外檢測器

1

 

7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥

1

 

色譜工作站

1

 

C18色譜柱 250*4.6  5um

1

 

平頭進(jìn)樣針

1

 

前處理設(shè)備

超聲波脫氣機(jī)

1

 

溶劑過慮裝置

1

 

真空泵

1

 

溶劑過濾頭

 

有機(jī)/水系

1.2試劑                                                      

腺苷對照品含量≥99.0

色譜純甲醇,水為超純水其他為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱 C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)

流動(dòng)相:甲醇磷酸鹽緩沖液(pH 6.5) = 101

流速為1.0 ml /min

檢測波長為260nm

柱溫為室溫,進(jìn)樣量為20 μl

2.2 供試品溶液的制備

取擬青霉約1.0g,精密稱定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,稱定重量,超聲20min,放至室溫后稱重,用甲醇補(bǔ)足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過后供分析。

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