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高效液相色譜法測定生物發(fā)酵產品中成分腺苷的含量

更新時間:2021-06-23      點擊次數:2091

 

高效液相色譜法測定生物發(fā)酵產品中成分腺苷的含量

 

本方法適用于蟲草、菌粉、靈芝等產品系列發(fā)酵產品

1 儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀( LC-500A) SPD-500紫外檢測器

N2000色譜工作站;

超聲波清洗器,十萬分之一天平;

 

1.2試劑                                          

腺苷對照品含量≥99.0

色譜純甲醇,水為超純水其他為分析純。

 

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱 C18( 150 mm × 4.6 mm5μm)

流動相:甲醇:磷酸鹽緩沖液(pH 6.5 = 101

流速為1.0 ml /min

檢測波長為260nm;柱溫為室溫;進樣量為10 μl

 

2.2 供試品溶液的制備

取擬青霉約1.0g,精密稱定,置于50 ml 量瓶,加入20% 甲醇定容至50 ml,密塞,稱定重量,超聲20min,放至室溫后稱重,用甲醇補足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過后供分析。


                                                                      腺苷標準品譜圖


               擬青霉樣品譜圖

 


                                                        頭孢菌樣品譜圖

3. 液相色譜儀器配置

Pos

Product Number

Qty

1

WK500-0102-002   LC-500A高壓輸液泵

1

2

WK500-1415-004   儀器啟動工具包

1

3

WK500-0101-001   SPD-500可變波長紫外檢測器

1

4

WK500-0413-003   7725i手動進樣閥 

1

5

WK500-0401-027   C18 250*4.6

1

6

WK500-1106-002   溶劑托盤

1

7

WK500-0301-001   色譜工作軟件 

1

8

樣品前處理包

1

(超聲波1臺,真空泵1臺,溶劑過濾器1套,

濾器、濾膜各2包)

 

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